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神经系统疾病模型建立方法
神经系统疾病在全球范围内造成了极大的医疗负担，研究其发病机制及干预手段对新药开发具有重要意义。动物模型在神经疾病的基础研究中发挥着不可替代的作用。根据疾病类型和研究目的不同，神经系统疾病模型可分为中枢神经系统模型（脑卒中、帕金森、阿尔茨海默病等）与外周神经系统模型（神经病理性疼痛、神经损伤再生等），建模方法包括物理损伤、化学诱导、遗传操作等多种形式。本文将详细介绍常见神经系统疾病动物模型的建立方法与实验关键点。
一、脑卒中模型（Stroke Models）
大脑中动脉阻断模型（MCAO）
原理：模拟缺血性脑卒中的血流阻断，最常用的为线栓法（filament occlusion）。
实验方法：
使用尼龙丝线插入颈内动脉，阻断大脑中动脉。
建议使用SD大鼠（250–300 g），全麻后进行显微操作。
阻断30–120分钟后拔除线栓，允许再灌注，模拟缺血再灌注损伤。
关键试剂：
氯胺酮（C649604）+赛拉嗪：麻醉剂
TTC染色剂（T109275）：用于脑梗死体积评估
注意事项：
操作需精细，避免误伤颈外动脉。
建议术后24小时进行神经功能评分和TTC染色评估。
二、帕金森病模型（Parkinson’s Disease, PD）
6-OHDA诱导模型
原理：6-羟基多巴胺（6-OHDA）选择性损伤中脑黑质-纹状体通路的多巴胺神经元。
实验方法：
通过立体定位注射6-OHDA至大鼠纹状体或中脑黑质。
注射前预处理阿托品与地塞米松，减少术后并发症。
一般使用Wistar或SD大鼠。
关键试剂：
6-OHDA（H135753）：诱导剂
抗氧化剂抗坏血酸钠（S105026）：保护6-OHDA稳定性
阿托品（A135946）（该产品非注射液）
地塞米松磷酸钠（D129705）（该产品非注射液）
模型评估：
阿扑吗啡诱导的旋转行为分析。
TH免疫组化检测多巴胺神经元损伤程度。
三、阿尔茨海默病模型（Alzheimer’s Disease, AD）
Aβ脑内注射模型
原理：通过注射β-淀粉样蛋白（Aβ1-42）在脑内聚集，形成类似人类AD的病理表现。
实验方法：
Aβ1-42溶解后聚集处理，立体定位注射入大鼠海马区。
可在术后7–14天进行认知行为测试。
关键试剂及仪器：
合成Aβ1-42肽（A647451，β-Amyloid (1-42), rat/mouse）
Y迷宫、Morris水迷宫行为测试仪
注意事项：
Aβ肽需预先聚集48小时。
聚集条件和温度控制是影响模型稳定性的关键。
四、脊髓损伤模型（Spinal Cord Injury, SCI）
自由跌落打击法（NYU Impactor）
原理：通过机械装置使特定重量的金属棒自由跌落冲击裸露的脊髓，模拟脊髓挫伤。
实验方法：
T9–T10节段暴露脊髓，设定跌落高度（一般10–25 mm）；
术后用抗生素预防感染。
关键试剂：
青霉素钠（P274325）+链霉素（S432672）：术后抗生素；
生理盐水+高糖培养液用于术后营养支持；
模型评估：
BBB评分量表；
组织HE染色和免疫组化评估损伤程度和炎症反应。
五、神经病理性疼痛模型（Neuropathic Pain）
坐骨神经结扎模型（CCI）
原理：通过微丝线松散结扎坐骨神经，引起慢性神经性疼痛。
实验方法：
在坐骨神经上结扎4根细丝，间距约1 mm。
建议使用SD大鼠，全麻下操作，术后恢复1周。
关键试剂及仪器：
·微手术线；
·氯胺酮（C649604）+赛拉嗪麻醉组合；
·von Frey毛细丝测痛仪用于机械痛敏测试；
六、遗传模型（转基因与敲除模型）
如APP/PS1小鼠（阿尔茨海默病）、α-突触核蛋白转基因小鼠（帕金森病）等，适用于慢性进展性神经退行性疾病研究。
实验优势：
模拟人类基因变异；
病理发生过程自然、缓慢，更符合临床。
注意事项：
饲养环境需稳定；
行为学测试需系统评估；
七、常见问题与优化建议
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