多肽酸碱性的预测与其溶解方法的选择
1.如何预测多肽的酸碱性?
赋值规则
- 酸性氨基酸:天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、C端–COOH→−1
- 碱性氨基酸:精氨酸(R)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)、N端–NH₂→+1
判定方法
- 总和>0→多肽整体带正电荷,为碱性
- 总和<0→多肽整体带负电荷,为酸性
- 总和=0→多肽整体为中性
2.多肽溶解性受什么因素影响?
多肽溶解性取决于其氨基酸组成:
- 亲水性氨基酸:Lys、His、Arg(碱性亲水),Glu、Asp(酸性亲水)
- 疏水性氨基酸:Leu、Ile、Val
3.多肽一般采用什么溶解策略?
- 优先选择:灭菌蒸馏水或去离子水
- 酸性肽难溶:可加入温和碱(如0.1%NH₃·H₂O)助溶
- 碱性肽难溶:可加入温和酸(如0.1%醋酸或0.1%TFA)助溶
- 疏水性肽难溶:先溶于DMF/DMSO,再加水稀释,完全溶解后加缓冲液
4.溶解过程中有哪些注意事项?
- DMF、DMSO可破坏二级结构帮助溶解,但可能影响多肽活性及后续实验
- 超声波处理可进一步促进溶解,特别是在使用有机溶剂时,溶解和稀释过程中均可辅助
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