如何选择合适的多肽纯度
1.多肽纯度是否越高越好?
不一定。纯度越高,价格越高,但并非所有实验都需要超高纯度。应根据实验目的选择适当的纯度,以平衡实验需求、可靠性与预算。
2.多肽纯度如何测定?
多肽纯度通常通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定,在220 nm(肽键最大吸收波长)下检测目标峰面积占总峰面积的比例。
常用条件:C18色谱柱(4.6×250 mm,5 μm,100 Å),梯度洗脱(乙腈浓度每分钟增加约1%)。
检测结果与色谱柱效能、梯度设置、溶剂选择密切相关,因此不同实验室结果可能略有差异。
3.不同应用推荐的最低纯度?
纯度级别 | 推荐应用 |
粗品(未纯化) | 突变筛选、序列优化、初步蛋白质组学研究 |
≥70%(免疫级别) | ELISA检测、多肽微阵列、多抗抗原设计、免疫动物、抗血清滴度检测 |
≥85%(生化级别) | Western blot(非定量)、体外生物分析、表位筛选、多抗开发、细胞粘附性研究、非定量酶学研究 |
≥95%(高纯度级别) | 定量ELISA、RIA、受体-配体相互作用(定量)、体内外生物学测定、NMR研究、定量酶学研究、阻断实验 |
≥98%(工业/药物级别) | SAR研究、晶体学研究、GMP级药物研发、临床研究、标准品及对照品制备 |
4.为什么选择高纯度?
结果更稳定:减少批次间差异
成功率更高:降低杂质干扰,避免重复实验
实验更可靠:适用于定量与高灵敏度实验
安全性更高:尤其在动物实验和临床研究中,高纯度必不可少
5.多肽的盐形式对实验有影响吗?
多数多肽以TFA盐形式交付,TFA残留可能影响某些实验。可根据需求选择醋酸盐、盐酸盐等替代形式,但成本通常高出20–30%。
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