蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）

无动物源

无载体

2000 gel units/μL

功能和特点

表达系统: E. coli
Accession #: UPI000AAD0772
生物活性: One Agarose Gel Unit is defined as the amount of enzyme required to digest 1μg of Lambda DNA in 15 minutes at 37℃, to the extent that the accumulation of low molecular DNA fragments is <400 base pairs as determined by agarose gel electrophoresis. Another Unit is Kunitz Unit. One Kunitz Unit is defined as the amount of enzyme required to release acid soluble oligonucleotides that produce an absorbance increase of O.D. 1.0 at 260nm in 30 minutes at 37 ℃ . 1000 Agarose Gel Units is approximately equal to 100 Kunitz Units.

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P752086-60KU	60KU	期货
P752086-5×60KU	5×60KU	期货

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Accession#: UPI000AAD0772 (3) Gene ID: WP_242350581.1 (3) MNase (3) Protein A (5) 内切酶与外切酶 (9) 微球菌核酸酶 (3)

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基本描述

产品名称

蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）

规格或纯度

EnzymoPure™, ActiBioPure™, 无动物源, 无载体, 生物活性, 无菌, 2000 gel units/μL

产品介绍

本公司生产的蛋白 A-微球菌核酸酶，英文名为 Protein A-MNase，简称 pA-MNase，是 Protein A 与微球菌核酸酶 MNase (Micrococcal Nuclease) 的融合表达产物，同时具有 Protein A 的抗体结合活性和 MNase 的核酸内切酶活性，常用于蛋白质-DNA 相互作用研究的 ChIC (Chromatin Immunocleavage) 和 CUT&RUN (Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease) 。 Protein A 是一种发现于金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)的细胞壁表面蛋白，分子量为 42kDa；Protein G 是 C 型或 G 型链球菌(Streptococcal bacteria)表达的免疫球蛋白结合蛋白。Protein A 和 Protein G 功能相似，能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)结合，结合的部位通常为免疫球蛋白的 Fc 区，但有资料显示 Protein A 也会和人 VH3 家族的 Fab 区结合，而 Protein G 有时与 Fab 区也有一定结合。同时，两者对于不同的免疫球蛋白亚类的结合能力有所不同。总体来说，针对大多数抗体，Protein A 和 Protein G 均具有广泛的适用性。本产品是 Protein A 与 MNase 的融合表达产物，同时具有 Protein A 结合抗体和 MNase 核酸内切酶的双重活性。来源（Source）：蛋白 A 与金黄色葡萄球菌（MNase）融合蛋白

组分和说明

P752086	Component	60KU	5*60KU	Storage
P752086	pA-MNase (2000 gel units/μl)	30μl	5*30μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用

常用于蛋白质 -DNA 相互作用研究的 ChIC (Chromatin Immunocleavage) 和 CUT&RUN (Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)。

产品优势

蛋白 A-微球菌核酸酶同时具备 Protein A 的抗体结合能力和 MNase 的核酸内切酶活性，特异性结合抗体，广泛的应用领域

使用说明

（一）染色质片段化

反应体系：反应缓冲液（10X）：50 mM Tris-HCl (pH 7.9)，5 mM CaCl₂。（建议添加 100 µg/ml 重组白蛋白（BSA）以提高稳定性。）

操作步骤：按每 4×10⁶个细胞加入 0.5-1 µl MNase（2000 gel units/µl），在 37℃孵育 15-30 分钟。通过琼脂糖凝胶电泳检测片段化效果，目标片段长度为 150-900 bp。加入适量 0.5 M EDTA（pH 8.0）终止反应。

（二）染色质免疫沉淀（ChIP）

染色质片段化：参考上述染色质片段化步骤。

免疫沉淀：使用蛋白 A-微球菌核酸酶结合抗体，捕获 DNA-蛋白质复合物。洗脱与纯化：根据具体实验方案进行洗脱和 DNA 纯化。

（三）CUT&RUN 和 CUT&Tag

固定细胞：使用甲醛交联细胞。

抗体结合：加入目标抗体，孵育过夜。

MNase 消化：加入蛋白 A-微球菌核酸酶，37℃孵育 15-30 分钟，释放 DNA。

DNA 纯化与测序：提取 DNA 并进行高通量测序。

保存条件： -20℃保存，≤0℃运输

注意事项：

（1）本品含 50%甘油，-20℃保存不会冻结。须避免-80℃保存，否则会冻结，反复冻融可能会影响酶的活性。

（2）本品较为粘稠，吸取时注意取样量准确，加样后请注意充分吹打混匀，避免产生气泡。

（3）Ca2+是 MNase 的关键催化辅助因子，反应缓冲液含有 1-5mM Ca²⁺对 MNase 的酶活性是必须的，反应溶液中如有 EDTA、EGTA 等金属离子螯合剂会影响酶活性。

（4）反应溶液中盐离子浓度须低于 100mM，过高的盐浓度会影响 MNase 的酶活性。

（5）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

（6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

生物活性

One Agarose Gel Unit is defined as the amount of enzyme required to digest 1μg of Lambda DNA in 15 minutes at 37℃, to the extent that the accumulation of low molecular DNA fragments is <400 base pairs as determined by agarose gel electrophoresis. Another Unit is Kunitz Unit. One Kunitz Unit is defined as the amount of enzyme required to release acid soluble oligonucleotides that produce an absorbance increase of O.D. 1.0 at 260nm in 30 minutes at 37 ℃ . 1000 Agarose Gel Units is approximately equal to 100 Kunitz Units.

表达系统

E. coli

种属

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)

无载体

Yes

无动物源

Yes

Accession #

UPI000AAD0772

来源

重组表达

产品规格参数

物理形态	液体
储存缓冲液	5mM Tris, 50mM NaCl, 1mM EDTA, 50% Glycerol, pH7.4
浓度	2000 gel units/μL
储存温度	-20°C储存,避免反复冻融
运输条件	超低温冰袋运输
稳定性与储存	长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。
分子类型	酶

安全和危险性（GHS）

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

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溶液计算器

摩尔浓度计算器

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质量

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基本描述

产品规格参数

安全和危险性（GHS）

质量标准

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

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